處理ELISA試劑盒有哪些要求和方法
需要在實驗前1小時將羊ELISA試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都康復到室溫,以使成果更安穩(wěn)。實驗時,要使底物避光保存,用槍汲取液體時速度不能太快,避免發(fā)生氣泡而使汲取量不準確,汲取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,削減差錯,要確保移液槍的準確性,差錯不能超過百分之2。
1.血清:室溫血液天然凝結10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細搜集上清,保存過程中如呈現(xiàn)沉積,應再次離心。
2.血漿:應根據(jù)羊ELISA試劑盒的標本的要求挑選EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),保存過程中如有沉積構成,應該再次離心。
3.尿液:用無菌管搜集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細搜集上清,保存過程中如有沉積構成,應再次離心。
4.細胞培養(yǎng)上清:檢測排泄性的成份時,用無菌管搜集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細搜集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。經過重復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細搜集上清。保存過程中如有沉積構成,應再次離心。
5.組織標本:切割標本后,稱取分量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮敏捷冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS,用手藝或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細搜集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6.標本采集后盡早進行提?。?/strong>提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能立刻進行實驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免重復凍融.
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