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膽紅素檢驗之現(xiàn)狀

2011/4/25 [1315]

膽紅素檢驗之現(xiàn)狀
 

1. 目前國內(nèi)膽紅素在臨床檢驗中主要存在的問題:
主要有三個方面的問題:
1)臨床檢驗結(jié)果之間的可比性較差:同樣一個檢測樣品,各廠家生產(chǎn)的試劑盒其檢驗結(jié)果往往相差很大,但并不能因此判斷出試劑盒的好壞。
2)正常水平的膽紅素含量比較低,使得檢測方法的靈敏度和檢測儀器的精密度成為影響檢測結(jié)果的重要因素之一。
3)氧化法測定膽紅素過程中對pH值的要求很嚴(yán)格,外來影響導(dǎo)致pH值的變化對檢測結(jié)果產(chǎn)生很大的影響。

2. 臨床檢驗結(jié)果之間的可比性較差的原因:
主要存在兩方面的問題:
1)標(biāo)準(zhǔn)品問題:膽紅素本身不穩(wěn)定,不易保存,特別是直接膽紅素制備困難;由于國內(nèi)目前沒有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)品供應(yīng),造成膽紅素標(biāo)準(zhǔn)品的標(biāo)準(zhǔn)化問題得不到解決;目前市場上銷售的膽紅素標(biāo)準(zhǔn)品多為各種膽紅素的混合物(或異構(gòu)體),不適于作為直接膽紅素測定的標(biāo)準(zhǔn)物。
2)直接膽紅素測定方法學(xué)上的概念模糊:一方面,近來膽紅素測定的方法主要有兩類,即重氮法和氧化法。據(jù)文獻(xiàn)報道,重氮法檢測了結(jié)合膽紅素和大部分的δ膽紅素,而氧化法檢測了結(jié)合膽紅素,是否包括δ膽紅素還是個未知數(shù),尚無相關(guān)數(shù)據(jù);另一方面,直接膽紅素和結(jié)合膽紅素的概念模糊,導(dǎo)致有人認(rèn)為直接膽紅素就是結(jié)合膽紅素,也有人認(rèn)為酶氧化法測定的結(jié)果是結(jié)合膽紅素,而化學(xué)氧化法測定的結(jié)果是直接膽紅素。由于上述的概念模糊,造成臨床上對檢測結(jié)果的解釋發(fā)生問題。

3.膽紅素具體分類:根據(jù)zui近修正的膽紅素定義,總膽紅素應(yīng)包括游離膽紅素、結(jié)合膽紅素及δ膽紅素,其中結(jié)合膽紅素又分為mBc和dBc。在重氮反應(yīng)中,直接膽紅素包括結(jié)合膽紅素和δ膽紅素,文獻(xiàn)報道只有85%左右的Bδ與重氮試劑發(fā)生直接反應(yīng)。

4.在氧化法檢測膽紅素的過程中,應(yīng)盡量減少pH值的影響: 加倍注意儀器的清洗,一定要清洗干凈對于某些儀器,膽紅素的檢測要避開強(qiáng)酸、強(qiáng)堿試劑項目,以防污染。

5. 同一標(biāo)本,直接膽紅素的重氮法檢測結(jié)果通常會高于氧化法的檢測結(jié)果的原因:因為重氮法檢測了結(jié)合膽紅素(Bc)和大部分的δ膽紅素(Bδ),而酶氧化法等只檢測了結(jié)合膽紅素(Bc)。