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深低溫保藏細胞的解凍

2011/5/17 [1065]

深低溫保藏細胞的建議解凍步驟:

離心法
1.從凍存管中取出細胞,用37℃水浴快速解凍。
2.將1-2ml 凍存細胞接種到大約25ml*生長培養(yǎng)基中。要非常
輕柔地進行混合。
3.用大約80 X g的速度離心2-3分鐘。
4.吸除上清液。
5.用*生長培養(yǎng)基輕輕重懸解離下來的細胞,并計算活細胞的
個數(shù)。
6.接種細胞。細胞接種量至少要達到3X105 活細胞/ml。


直接接種法
1.從凍存管中取出細胞,用37℃水浴快速解凍。
2.將細胞直接接種到*生長培養(yǎng)基中。每毫升凍存細胞需要 
 10-20ml*生長培養(yǎng)基。計算活細胞的個數(shù)。細胞接種量至
 少要達到3X105 活細胞/ml。
3.將細胞培養(yǎng)12-24h。更換新鮮*生長培養(yǎng)基以去除抗凍劑。